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雅致放射毛霉AS3．2778是腐乳酿造业的一株优良菌株，毛霉菌种的优劣对于腐乳的生产起极其重要的作用，但是国内外对它的研究却一直少见报道。在液体培养条件下的生长特性、酶学性质的研究报道极少，将液体毛霉菌种应用于腐乳生产上的研究还是空白。 为了改进腐乳生产中菌种制作的传统工艺，将现代发酵工程技术应用于腐乳生产，进一步实现腐乳生产工艺的自动化、规模化，同时能够提高腐乳产品的质量，本项研究尝试了毛霉AS3．2778的液体深层培养及工业规模发酵液体毛霉菌种应用于腐乳生产的研究，并对毛霉AS3．2778在液体培养条件下的生长特性、发酵条件、蛋白酶活性等进行了较为全面的探讨。 研究结果表明：在本试验条件下，雅致放射毛霉AS3．2778在以黄豆粉为原料的液体培养基中，28℃、200rpm摇瓶培养条件下可以生长得很好。在前24小时内，菌丝体大量积累，最终菌丝平均生物量(菌丝体干重)可以达到1.02g／100ml。它的生长规律基本符合逻辑斯蒂生长模型，二级发酵几乎没有迟滞期，直接进入指数生长期，36—40小时进入稳定期。在发酵滤液中具有一定的糖化淀粉酶活和脂肪酶活，并具有较高的蛋白酶活。 单一组分影响实...更多验及方差分析表明，黄豆粉、蔗糖、磷酸二氢钾都有利于毛霉AS3．2778液体培养时滤液中蛋白酶活的提高。正交实验及分析结果表明，在一定浓度范围内，饴糖的浓度越高，越不利于蛋白酶的产生。低碳氮比有利于蛋白酶活的产生，在碳氮比为1.2左右可以得到较高的蛋白酶活。毛霉AS3．2778蛋白酶的产生需要较高的通风量，最适起始pH为6，在36小时达到产酶高峰期。检测表明滤液中的蛋白酶活一般可以达到10—20u／ml。 工业发酵及生产应用结果表明，利用豆浆和黄浆水作为培养基，毛霉AS3．2778于28℃、通风比0—12h 1:1(vvm) 12h后1:2(vvm)条件下发酵培养，在50L通用式罐和180L外循环气升式罐内24小时生物量可以分别达到24.55g／100ml和27.69g／100ml(菌体湿重)，而且外循环气升式罐较通用式设备显示出多种优势。毛霉AS3．2778液体培养菌种在腐乳生产中可以得到很好的应用，液体种发酵周期在16—24小时。当菌体湿重在20g／100ml以上，菌液稀释2倍时，可以显示出比生产用种明显的优势，使前发酵周期缩短6—8小时，形成的菌膜更致密厚实。河北大学理学硕士学位论文 研究结果证实，以工业化液体深层发酵方式培养雅致放射毛霉液体菌种应用于腐乳生产完全可行。目前本项研究已经在腐乳工业化生产中得到应用，并表现出良好的应用效果。
雅致放射毛霉液体深层培养及工业应用研究
摘要4-8
目录8-10
第1章 绪论10-21
1.1 引言10
1.2 腐乳生产工艺及发酵机理研究10-15
1.2.1 腐乳生产工艺10-11
1.2.2 腐乳生产工艺研究及发展方向11-13
1.2.3 豆腐乳发酵的生化变化13-14
1.2.4 毛霉在腐乳生产中的作用14
1.2.5 结束语14-15
1.3 国内外毛霉的相关研究概况15-19
1.3.1 应用于腐乳的毛霉菌种选育及生长特性研究15-16
1.3.2 毛霉的产酶特性研究16-18
1.3.3 毛霉液体培养生产活性物质研究18-19
1.3.4 结束语19
1.4 雅致放射毛霉毛霉液体深层发酵和液体种应用的研究意义19-21
第2章 毛霉AS3.2778液体培养条件优化及基本生理研究21-32
2.1 引言21
2.2 材料与方法21-22
2.3 结果与分析22-29
2.3.1 摇瓶发酵培养基的优化22-24
2.3.1.1 不同碳源对菌丝体生长的影响22
2.3.1.2 不同氮源对菌丝体生长的影响22-23
2.3.1.3 无机盐对菌丝体生长的影响23
2.3.1.4 发酵培养基正交实验23-24
2.3.2 摇瓶发酵条件试验24-26
2.3.2.1 起始pH值对菌丝体生长量的影响24-26
2.3.2.2 摇瓶装液量对菌丝产量的影响26
2.3.2.3 摇瓶转速对菌丝产量的影响26
2.3.2.4 接种量对菌丝产量的影响26
2.3.2.5 其它条件26
2.3.3 液体培养毛霉AS3.2778菌丝的生长情况26-28
2.3.3.1 菌体生长曲线及数学模型的建立26-28
2.3.3.2 菌体生长pH值变化及糖耗情况28
2.3.4 液体培养毛霉AS3.2778的产酶特征28-29
2.3.4.1 毛霉AS3.2778糖化型淀粉酶的产生28-29
2.3.4.2 毛霉AS3.2778蛋白酶的产生29
2.3.4.3 毛霉AS3.2778脂肪酶的产生29
2.4 讨论29-31
2.5 小结31-32
第3章 深层发酵诸因素对毛霉AS3.2778蛋白酶产生的影响32-41
3.1 引言32
3.2 材料和方法32-33
3.3 结果与分析33-39
3.3.1 不同氮源对蛋白酶活性的影响33
3.3.2 不同碳源对蛋白酶活性的影响33-34
3.3.3 无机盐对蛋白酶活性的影响34-35
3.3.4 毛霉AS3.2778蛋白酶产生的正交实验及碳氮比的影响35-36
3.3.5 转速对蛋白酶产生的影响36-37
3.3.6 起始pH值对蛋白酶产生的影响37-38
3.3.7 发酵周期对蛋白酶产生的影响38
3.3.8 毛霉AS3.2778产生的蛋白酶的组成38-39
3.4 讨论39-40
3.5 小结40-41
第4章 毛霉发酵中试及液体种在腐乳生产中的应用研究41-48
4.1 引言41
4.2 材料与方法41-42
4.3 结果和分析42-46
4.3.1 毛霉AS3.2778工业发酵中试研究42-43
4.3.1.1 毛霉AS3.2778种子罐6批次发酵结果42-43
4.3.1.2 发酵期间各指标变化情况43
4.3.2 液体毛霉菌种在豆腐坯上应用试验43-46
4.3.2.1 摇瓶液体菌种在豆腐坯上生长试验43-44
4.3.2.2 种子罐发酵液在生产上应用试验44-46
4.4 讨论46
4.5 小结46-48
第5章 结语48-49
参考文献49-57
致谢57
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