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海狗油是从海狗中提取出来的一种油脂，其主要活性成分为多不饱和脂肪酸，如二十碳五烯酸（EPA） 、二十二碳五烯酸（DPA） 、二十二碳六烯酸 （DHA）等。本论文对海狗油的理化性质、海狗油中游离多不饱和脂肪酸的富集方法、酶促催化游离脂肪酸与甘油的合成等方面进行了研究。对海狗油的理化性质如碘值、酸值、过氧化值、折光率、比重、水分、皂化值等进行了分析研究，利用原子吸收分光光度计和高效液相色谱仪分别对其金属元素和维生素进行了分析和鉴定，并借助紫外分光光度计、红外光谱仪和气相色谱-质谱连用仪对其脂肪酸组成、结构、含量进行初步确证。杂环化衍生法联合GC/MS分析结果表明：海狗油中共有30种不同碳链长度、双键位置和双键数目的脂肪酸，其中多不饱和脂肪酸总含量达20.97％，含EPA 4.61％，DPA 3.30％，DHA 8.83％。简要分析了影响海狗油皂化效果的皂化时间、乙醇/水（V/V）比例和皂化温度三种因素，结果显示较好的皂化条件为：皂化时间1 h，乙醇/水（V/V）比例6:1，皂化温度60(C。在此条件下脂肪酸的产率为93.2％，其中含EPA 5.72％、DHA10.55％和DPA 4.83％...更多。详细研究了尿素/脂肪酸的质量比、结晶时间和结晶温度三种单因素对尿素包合法富集多不饱和脂肪酸效果的影响。结果显示适宜的尿素包合条件为：尿素/脂肪酸的质量比4.5:1；结晶时间20 h；结晶温度4(C，在此条件下未包合脂肪酸中EPA、DPA和DHA的总含量可从21.1％提高至73.32％，富集得率为17.91％。研究了在脂肪酶N 435的催化作用下，游离多不饱和脂肪酸与甘油酯化合成的工艺，分别考察了甘油与脂肪酸的质量比、反应时间、反应温度、酶用量、初始加水量等单因素对酯化效果的影响，并用正交试验进一步优化了合成工艺。结果显示较优的酶促酯化合成条件为：甘油与脂肪酸的质量比0.12:1，反应时间48 h，反应温度50(C，加酶量与底物游离脂肪酸的比例1:4（w/w），初始加水量0。在此条件下，游离多不饱和脂肪酸与甘油合成的酯化率可达96.58％。本文在国内首次就海狗油中游离多不饱和脂肪酸的富集工艺、酶促酯化合成甘油酯工艺等作了比较系统的研究，此项研究对今后开发应用此功能性食品具有重要实际价值，具有一定的社会和经济效益。
海狗油多不饱和脂肪酸富集及酯化工艺的研究
摘要5-6
Abstract6
第一章 绪论7-15
1.1 海狗油概述7-9
1.1.1 海狗与海狗油简介7
1.1.2 海狗油与鱼油区别7-9
1.2 多不饱和脂肪酸的生理功能及研究概况9-12
1.2.1 多不饱和脂肪酸的功能特性9
1.2.2 多不饱和脂肪酸的市场状况9-10
1.2.3 多不饱和脂肪酸富集提纯工艺简介10-12
1.3 酶促合成脂肪酸甘油酯12-13
1.3.1 有机溶剂体系中酶促合成甘油酯12
1.3.2 微乳液体系中酶促合成甘油酯12
1.3.3 无溶剂法酶促合成甘油酯12
1.3.4 超临界CO2体系中酶促合成甘油酯12-13
1.4 立题背景、意义和研究内容13-15
1.4.1 立题背景13
1.4.2 立题意义13-14
1.4.3 研究内容14-15
第二章 海狗油的理化性质及成分分析15-25
2.1 引言15
2.2 材料与方法15-17
2.2.1 实验仪器15
2.2.2 实验试剂与材料15-16
2.2.3 实验方法16-17
2.3 结果与讨论17-23
2.3.1 海狗油的理化性质分析17-19
2.3.2 海狗油组成成分及脂肪酸结构鉴定19-23
2.4 本章小结23-25
第三章 尿素包合法富集海狗油中的多不饱和脂肪酸25-39
3.1 引言25
3.2 材料与方法25-27
3.2.1 实验仪器25-26
3.2.2 实验试剂与材料26
3.2.3 实验方法26-27
3.3 结果与讨论27-38
3.3.1 影响皂化效果的因素分析27-29
3.3.2 影响尿素包合效果的因素分析29-32
3.3.3 尿素包合富集多不饱和脂肪酸的条件优化32-38
3.3.4 脲包后所得脂肪酸的两个重要指标检测38
3.4 本章小结38-39
第四章 微水体系中酶促酯化合成多不饱和脂肪酸甘油酯39-51
4.1 前言39
4.2 材料与方法39-41
4.2.1 实验仪器39-40
4.2.2 实验试剂与材料40
4.2.3 实验方法40-41
4.3 结果与讨论41-50
4.3.1 脂肪酶的选择41
4.3.2 酶活力测41-42
4.3.3 薄层层析法定性分析产物组成42
4.3.4 反应时间对酯化效果的影响42
4.3.5 分子筛加入时间对酯化效果的影响42-43
4.3.6 初始加水量对酯化效果的影响43-44
4.3.7 酶用量对酯化效果的影响44-45
4.3.8 反应温度对酯化效果的影响45
4.3.9 摇床转动速率对酯化效果的影响45-46
4.3.10 甘油/脂肪酸质量比对酯化效果的影响46-47
4.3.11 正交试验优化最佳反应条件47-48
4.3.12 产品提纯及检测48-50
4.4 本章小结50-51
主要结论51-52
问题与展望52-53
致 谢53-54
参考文献54-59
附录59
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